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同一种填料的分析柱、制备柱按线形放大公式套,分离度会不会变化?

一般会有一定的变化,原因有以下几点:

1制备柱的装填是否均匀,如不均匀则可能产生涡流扩散使各个组分的经过通道的直径不同、阻力不一样,停留时间不同,色谱峰可能变宽。

2如果样品在流动相中溶解度小,在制备色谱上会有不同的峰展宽。

3如果样品在分析柱上有展宽或拖尾的现象,放大到制备柱上后峰的展宽和拖尾经常会非常-,导致分离失败。






制备色谱的填充

填料是工业制备色谱的血脉,填料的选择和利用是非常关键的,目前已有越来越多的产品应用到ipc中。填料的化学性质和物理性质决定了色谱的分离性能和动力学性能。应用于-工业化制备色谱中的填料具有如下特殊的要求。  

1、机械强度高:填料需要承受很大的机械压力,因为填料在ipc使用中,需要经常装卸,机械性能差的填料经受不住反复填充,它们易破碎,产生细颗粒,降低柱渗透性,甚至堵塞滤片,造成流速分布不均匀,影响分离产物的纯度,在系统中产生-的柱压而无法继续使用引。  

2、负载量大:在ipc中,填料的负载量越大,则单位体填料可处理的原料量就可增加,因而提高了产率。选择合适孔径及孔径分布的填料是获得高负载量的一个关键因素。  

3、可大量供应,批间的重现性好:制备色谱工艺过程要扩大,必须有-的供货源提供大量填料,否则无法实现工业化。填料各批量之间的化学和机械稳定性、孔结构及可重复的比表面积等必须具有高度的重现性,否则难以-长期、持续、稳定的分离与纯化生产工艺。  

4、合适的颗粒大小和窄的粒度分布范围:细颗粒可增加塔板数及分辨率,但同时引起装柱困难,需要更高的操作压力。



工业制备色谱

工业色谱又称制备色谱。利少{j组分的差速迁移而实现i.业规模混合物分离的方法它包括一个流动相(被分离的气相或液相)和一个固定相。两相在色谱柱r},进行接触,在色谱柱l,流动相沿固定相流动,由」几混合物中各组分被固定相滞流程度不同,它们随流动相移动的速度就不同,因而可使各组分.4.相分离。根据流动相的不}.可,可分为}l相色谱与液相色谱两类。根据固定相的类型,可分为吸附色谱、分配色ih离子交换色谱、亲和色潜排i}}l色谱五类。上业色谱可分离选择性系数非常接近的组分,它适用于热敏n}物质的分离,对制备高纯物质-有效



用于制备和生产的-生物分离技术所面临的问题是:如何在不破坏目标蛋白质的生物活性的前提下(温和的条件),以-的识别性,以及较高的分离能力和收率,经济有效地从稀溶液中提取、分离、纯化目标产物。吸附通常可以在常温、水相、适当的ph、离子强度、避免使用等有害的化学试剂等温和的条件下操作,液相色谱具有-的分离性能,适合于生物分离过程的要求。





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