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制备色谱柱如何测柱效？

可以选择几种物质，-，萘、蒽等的衍生物上柱，流动相一般用65-80%的-/水，测定后根据保留时间计算塔板数。由于制备色谱的管路死体积一般比较大，很难得到和供应商相同的柱效。建议在制备柱开始使用时在自己的色谱上测一下柱效，然后定期检测柱效进行以进行比较。

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制备色谱的填充

填料是工业制备色谱的血脉，填料的选择和利用是非常关键的，目前已有越来越多的产品应用到ipc中。填料的化学性质和物理性质决定了色谱的分离性能和动力学性能。应用于-工业化制备色谱中的填料具有如下特殊的要求。　　

1、机械强度高：填料需要承受很大的机械压力，因为填料在ipc使用中，需要经常装卸，机械性能差的填料经受不住反复填充，它们易破碎，产生细颗粒，降低柱渗透性，甚至堵塞滤片，造成流速分布不均匀，影响分离产物的纯度，在系统中产生-的柱压而无法继续使用引。　　

2、负载量大：在ipc中，填料的负载量越大，则单位体填料可处理的原料量就可增加，因而提高了产率。选择合适孔径及孔径分布的填料是获得高负载量的一个关键因素。　　

3、可大量供应，批间的重现性好：制备色谱工艺过程要扩大，必须有-的供货源提供大量填料，否则无法实现工业化。填料各批量之间的化学和机械稳定性、孔结构及可重复的比表面积等必须具有高度的重现性，否则难以-长期、持续、稳定的分离与纯化生产工艺。　　

4、合适的颗粒大小和窄的粒度分布范围：细颗粒可增加塔板数及分辨率，但同时引起装柱困难，需要更高的操作压力。

薄层色谱tlc

薄层色谱，又称为薄层层析，以合适的溶剂作为流动相，以涂布在支持板上的支持物作为固定相。分离的原理是吸附。一个或多个样品涂在有薄层板上。如下图所示，该板部分浸入展开剂中，溶剂沿着吸附剂移动。样品组分随展开剂以不同的速率移动，这取决于它们对吸附剂的亲和力，从而实现组分分离。薄层色谱与纸色谱类似，可用于分析任何类型的样品，但通常用于分析植物提取物、碳水化合物、蛋白质、-等。